조직, 기관 및 생체 모델 유기체와 같은 큰 샘플의 이미지를 캡처하려면 한 번에 관찰 가능한 영역을 확장하여 이미지를 캡쳐하는 속도가 빨라야합니다.
A1 HD25 / A1R HD25 공 초점 현미경은 분야에서 가장 넓은 시야 25mm(기존 18mm)를 가지고있어 사용자가 과학 연구의 한계를 넓힐 수 있습니다.
공 초점 해상도로 이전보다 더 넓은 영역 관찰
A1 HD25 / A1R HD25은 도립 현미경 Ti2-E에 장착함으로써 기존의 시야 범위 18mm의 약 2 배나 넓은 시야로 이미지 검색을 제공합니다. 스캔 한 번으로 더 넓고, 더 많은 정보를 획득할 수 있기 때문에 연구의 속도 향상에 기여하고 있습니다.
대형 고 해상도 이미지 스티칭에 필요한 총 이미지 수 감소
A1 HD25 / A1R HD25는 F.O.V.(Field Of View)25mm의 넓은 시야 이미지를 획득할 수 있기 때문에 이미지 타일링(Stitching)에 필요한 수집 수를 줄일 수 있어 촬영 시간의 대폭적인 단축을 실현합니다. 넓은 시료의 효율적이고 높은 처리량의 이미징을 가능하게합니다.
A1 HD25 / A1R HD25 (시야 영역 25mm) : 총 이미지 획득 수 24장
기존 모델 (시야 영역 18mm) : 총 이미지 획득 수 48장
이미지 해상도를 손상시키지 않으면서 분석 처리량 증가
형광 조명 광학계는 광역화와 소형화를 동시에 성립하였읍니다. 석영 재질의 플라이 아이 렌즈(Fly Eye Lens : 파리의 눈 렌즈)는 자외선(UV) 영역을 포함하여 넓은 파장 범위에서 높은 투과율을 실현합니다. 큰 구경의 하드 코팅(고 강도 코팅) 형광 필터 큐브는 넓은 시야와 높은 신호 대 잡음 비(S/N비) 형광 이미징과 긴 수명을 보장합니다.
96 웰플레이트 내의 웰이 선택
넓은 F.O.V.는 전체 웰 한 번에 획득 가능 (4배 대물렌즈)
넓은 F.O.V.는 넓은 시료 영역의 측정 및 분석의 처리량 향상
A1R HD25 고 속, 고 화질 레저넌트 스캐너
※ 최대 1K x 1K의 고화질 이미징
최대 1,024 x 1,024 픽셀을 사용하면 저 배율에서 고 해상도의 고 화질 이미지를 획득할 수 있으므로 다양한 시료에 적용 가능합니다.
RapiClear1.52, SunJin Lab을 이용하여 투명화 한 H-line 마우스의 2mm 뇌 조각에서 미세 구조의 넓은 시야(F.O.V.) 이미지와 6배 줌한 상세 이미지 픽셀 : 1,024 x 1,024
이미지 제공 : 홋카이도대학 전자과학연구소 광 세포 생리 연구 분야 Drs.카와카미 료스케, 오토모 코헤이, 네모 토모미
※ 살아있는 세포에 대한 낮은 광 독성
최대 720 F.P.S.(Frame Per Second)의 고 속 이미징 기능은 넓은 시야와 결합하여 이미징 처리량을 획기적으로 향상시킵니다. 이 스캐닝 방법은 시료의 여기 광에 대한 노출 시간을 줄여 광 독성(phototoxicity) 및 광 표백(photobleaching)을 최소화합니다.
갈바 노 스캐너
레저넌트 스캐너
갈바노(Galvano) 및 레저넌트(Rsonent) 스캐너를 사용하여 이미지를 수집 할 때 형광 단백질의 광 표백(photobleaching) 비교.
내피 세포에서 LIFEACT-mCherry (F-액틴 프로브)를 발현하는 제브라 피쉬 유충의 간체 혈관계의 3차원 시간 경과 이미지를 갈바노(Galvano) 스캐너 (평균 2 이미지) 및 레저넌트(Rsonent) 스캐너(평균 64 이미지)를 사용하여 15시간 동안 30분 마다 영상 획득.
1,024 x 512 픽셀, 2배 줌, 100장 Z-스택 이미지
LIFEACT-mCherry의 photobleaching은 공진 스캐너를 사용하여 극적으로 억제되었습니다.
이미지 제공 : 일본의과대학 첨단의학연구소 분자병리생리학 유야 신야 박사, 후쿠하라 시게 토모 박사
※ 살아있는 세포의 3D 이미징
소장 상피 세포의 3D 배양 시스템이다 enteroid을 이용하여 carbachol 자극에 대한 Paneth 세포의 과립 분비 응답 속도 4D 라이브 이미징 (61 단계의 Z 이미지를 1.98 초 / 볼륨에서 영상 획득, Piezo Z-스테이지, 1K 레저넌트 스캐너 사용)
Paneth 세포의 과립(녹색)이 엔테로이드 루멘으로 하나씩 분비되어 자연 면역 반응을 고해상도 3D 시간 경과 영상으로 획득.
녹색 : Zinpyr-1 (Paneth 세포 과립), 보라색 : CellMaskTM Deep Red (세포막)
여기 파장 : 488 nm, 638 nm
해상도 : 1024 × 512 pixels
이미지 제공 : 홋카이도대학 생명과학대학원 생명과학부 첨단생명과학연구원 세포생명과학과 선천면역연구실 요코이 유키 박사, 나카무라 기미노리 박사, 아야베 토기요시 박사
혈관 내피 세포의 액틴 섬유와 세포막을 mCherry와 GFP로 가시화 한 제브라 피쉬 배아의 혈관 신생의 시간 경과 영상. 수정 후 22 시간에서 레저넌트 스캐너 (64개 평균)에서 2.5분 마다 14시간 동안 3D 타임 랩스 영싱 획득.
화소 수 : 1024 × 1024 줌 2X, 68 개의 Z 스택 이미지
혈관 신생 과정의 혈관 내피 세포의 신속한 형성과 후퇴가 선명하게 시각화되어있다.
이미지 제공 : 일본의과대학 첨단의학연구소 분자병리생리학 유야 신야 박사, 후쿠하라 시게 토모 박사
매크로 및 마이크로 이미지 모두를 위한 우수한 이미지
연구 내용에 맞게 매크로에서 마이크로까지 다양한 시료 이미징을 한 대의 장비 A1 HD25 / A1R HD25로 가능하며. 대형 시료의 관찰은 시야 범위 25mm, 미세 구조의 관찰에는 고 화질 모드 (4K 또는 1K)이 각각 효과를 발휘합니다.
CFI Plan Apochromat Lambda 10X 대 렌즈로 획득한 비단 원숭이 뇌의 전체 그림의 타일링 이미지와 CFI SR HP Plan Apochromat Lambda S 100XC Sil 대물렌즈로 획득한 척추의 상세 이미지 (돌기의 위치[깊이]).
다양한 종류의 형광 다양한 형광 색소를 지원하는 고감도 검출기
※ GaAsP 멀티 검출기 유닛 A1-DUG-2
A1-DUG-2는 고감도 GaAsP PMT가 장착 된 4채널 검출기로 형광이 약하거나 검출기가 고속 레저넌트 스캐너와 함께 사용되는 경우에도 최소한의 배경 잡음으로 밝은 신호를 획득할 수 있습니다.
MitoTracker로 라벨링 된 HeLa 세포의 이미지와 Intensity Surface Plot. 형광 강도를 3D 그래프에서 색상 및 높이로 함께 표시됩니다. GaAsP PMT (왼쪽)와 Multi-Alkali PMT (오른쪽)를 비교하면 배경 잡음의 크기과 이미지의 시간 변화에 차이를 볼 수 있습니다.
※ A1-DUVB-2 GaAsP 검출기 유닛
A1-DUVB-2는 고감도 GaAsP PMT가 장착되어 있으며 갈바노 및 레저넌트 스캐너를 모두 사용하는 스펙트럼 이미징이 가능합니다. 10nm의 파장 분해능으로 검출 파장 대역을 자유롭게 설정하는 것이 가능하기 때문에 채널마다 검출 파장 범위와 게인, 레이저 파워를 설정하여 이미지를 얻을 수 있습니다. VB(Variable Bandpass : 가변 대역 통과) 모드와 CB(Continuous Bandpass : 연속 대역 통과) 모드를 응용 프로그램을 기반으로 선택할 수 있으며 겹치는 스펙트럼의 형광 표식을 정밀하게 분리할 수 있습니다. 두 번째 고정 대역폭 방출 채널을 추가하는 옵션 추가 시 동시 멀티 채널(2 채널) 이미징을 가능하게합니다
VB(Variable Bandpass : 가변 대역 통과) 모드
최대 5채널의 컬러 이미징이 가능하다.
CB(Continuous Bandpass : 연속 대역 통과) 모드 (Umixing 이미지)
최대 32ch의 스펙트럼 이미징이 가능하다.
DAPI(핵), Alexa Fluor®488(바이멘틴), Alexa Fluor®568(라민), Alexa Fluor®594(튜블린), Alexa Fluor®633(액틴)의 5색으로 다중 형광 염색한 HeLa 세포.
이미지 제공 : 쿠루 메 대학 의학부 피부과교실 타다 가라 시마 마사시 박사
※ A1-DUS 스펙트럼 검출기 유닛
최대 2.5nm의 파장 분해능에 의한 스펙트럼 이미징이 가능합니다. 32채널(최대 320nm)의 스펙트럼을 한 번의 스캔으로 획득할 수 있기 때문에 512 × 32 픽셀의 경우 초당 24프레임의 빠른 영상 획득을 가능
5색 형광 염색한 HeLa 세포의 스펙트럼 이미지와 그 Unmixing(형광 분리) 처리 후 이미지.
시료 제공 : 쿠루메대학 의학부 피부과교실 가라시마 토다시
고유한 V-필터링 기능은 필터가없는 강도 조정 기능을 갖추고있어 32개의 채널 중에서 임의의 스펙트럼 범위를 선택하여 최대 4개의 필터로 필터링 기능을 수행할 수 있으므로 각 형광 프로브의 최적 강도로 이미징 할 수 있습니다.
모든 공 초점 응용 분야를 지원하는 우수한 광학 기술
공 초점 이미징의 가능성을 넓히는 탁월한 고 성능 / 고 품질의 대물렌즈를 폭넓게 제공합니다.
두꺼운 살아있는 세포를 관찰할 수 있는 실리콘 침지 대물렌즈를 비롯해 넓은 시야의 낮은 배율 대물렌즈 및 사용하기 쉬운 드라이 대물렌즈 등이 있습니다. 자외선 영역에서 근적외선 영역까지의 색수차를 보정하여 뛰어난 고화질 멀티 컬러 이미징 제공합니다.
※ 공 초점 이미징을 위한 최고 성능의 광학렌즈
자외선(UV)에서 근 적외선(NIR)에 대한 색수차 보정을 제공하는 고 개구수(N.A.) 대물렌즈가 제공됩니다.
☞ CFI SR HP Plan Apochromat Lambda S 100XC Sil
이 액상 액체로 살아있는 세포의 굴절률과 매우 유사한 굴절률을 갖는 실리콘 오일을 사용함으로써 두꺼운 시료의 고 해상도 이미징을 가능하게하고 긴 시간 이미징에 적합합니다.
개구수(N.A.) : 1.35
색수차 보정 : 가시 광선에서 자외선(UV)까지
나노 크리스탈 코트 적용.
☞ CFI Plan Apochromat 10xC Glyc
이 렌즈는 동작거리가 길어 최대 선명도와 명암을 지닌 매우 깊은 이미징을 제공합니다. 다중 굴절률의 지원은 물, 기름 및 글리세린 뿐만 아니라 다양한 광학 세정액으로 관찰할 수 있습니다.
동작거리(W.D.) : 5.5mm
개구수(N.A.) : 0.5
색수차 보정 : 가시광선에서 적외선(IR)까지
나노 크리스탈 코트 적용
☞ CFI Apochromat LWD Lambda S 20XC WI
물 침지 대물렌즈의 높은 개구수(N.A.)는 보다 밝고 고 해상도의 이미지를 제공하며 공 초점 라이브 셀 이미징에 이상입니다.
동작거리(W.D.) : 0.95mm
개구수(N.A.) : 0.95
색수차 보정 : 가시광선에서 적외선(IR)까지
나노 크리스탈 코트 적용
☞ CFI Apochromat Lambda S 40XC WI
물 침지 대물 렌즈의 높은 개구수(N.A.)는보다 밝고 고 해상도의 이미지를 제공하며이 렌즈를 공 초점 라이브 셀 이미징에 이상적으로 만듭니다..
개구수(N.A.) : 1.25
색수차 보정 : 자외선(UV)에서 근 적외선(NIR)까지
나노 크리스탈 코트 적용
☞ CFI Plan Apochromat IR 60XC WI
이 렌즈는 60배 물 담금용 대물렌즈로 가장 높은 개구수(N.A.)를 가지며 시야 전체에 걸쳐 평탄도를 유지하면서 넓은 파장 범위에서 색수차를 양호하게 보정합니다.
개구수(N.A.) : 1.27
슈퍼 이미지 평탄도
색수차 보정 : 가시광선에서 적외선(IR)까지
나노 크리스탈 코트 적용
☞ CFI Apochromat TIRF 60XC Oil
이 렌즈는 공 초점 이미징에서 탁월한 해상도와 효율적인 형광 신호 획득을 제공고 최고의 개구수(N.A.)를 갖추고 있습니다.
개구수(N.A.) : 1.49
우수한 투과율을 위한 나노 크리스탈 코팅
Nikon의 독점적인 Nano Crystal Coat는 초 미세 결정 입자로 구성된 반사 방지 코팅재입니다. 이것은 낮은 굴절률을 가능하게하는 거친 구조를 형성하여 렌즈를 반사하는 것이 아니라 렌즈를 통해 빛의 통과를 용이하게하여 우수한 빛의 투과율을 제공합니다.
◎ 공 초점 현미경 용 대물렌즈
품명
개구수(N.A.)
동작거리(W.D.)[mm]
비고
CFI Plan Apochromat 10XC Glyc
0.50
5.50
나노 크리스탈 코트
CFI Plan Apochromat Lambda 10X
0.45
4.00
나노 크리스탈 코트
CFI Plan Apochromat Lambda 20X
0.75
1.00
나노 크리스탈 코트
CFI Plan Apochromat Lambda 40XC
0.95
0.21
나노 크리스탈 코트
CFI Plan Apochromat Lambda 60XC
0.95
0.21-0.09
나노 크리스탈 코트
CFI Plan Apochromat Lambda 60X Oil
1.40
0.13
나노 크리스탈 코트
CFI Plan Apochromat Lambda 100X Oil
4.45
0.13
나노 크리스탈 코트
CFI Plan Apochromat VC 20X
0.75
1.00
CFI Plan Apochromat VC 60XC WI
1.20
0.31-0.28
CFI Plan Apochromat VC 100X Oil
1.40
0.13
CFI Plan Apochromat IR 60XC WI
1.27
0.18-0.16
나노 크리스탈 코트
CFI SR Plan Apochromat IR 60XC WI
1.27
0.18-0.16
나노 크리스탈 코트
CFI SR HP Plan Apochromat Lambda S 100XC Sil
1.35
0.30
나노 크리스탈 코트
CFI Apochromat Lambda S 40XC WI
1.25
0.20-0.16
나노 크리스탈 코트
CFI Apochromat Lambda S 60X Oil
1.40
0.14
나노 크리스탈 코트
CFI Apochromat LWD Lambda S 20XC WI
0.95
0.95
나노 크리스탈 코트
CFI Apochromat LWD Lambda S 40XC WI
1.15
0.62-0.58
나노 크리스탈 코트
CFI Apochromat TIRF 60XC Oil
1.49
0.14-0.08 (23℃),
0.16-0.10 (37℃)
CFI Apochromat TIRF 100XC Oil
1.49
0.14-0.08 (23℃),
0.15-0.09 (37℃)
CFI75 Apochromat 25XC W
1.10
2.00
나노 크리스탈 코트
RapiClear로 투명하게 한 해마의 상세한 심부 사진.
SunJin Lab,
CFI Apochromat LWD Lambda S 20XC WI 대물렌즈로 취득.
RapiClear로 투명하게 한 척수의 신경 회로(녹색)과 혈관(보라색),
SunJin Lab,
CFI Apochromat LWD Lambda S 20XC WI 대물렌즈로 취득.
고속 라이브 셀 이미징 중 Photostimulation(광 자극)을 위한 옵션
Ti2-LAPP 모듈 방식 조명 시스템에서 사용자가 정의한 관심영역(ROI) 자극을 위한 포인트 스캐닝 기능을 갖춘 새로운 광 자극 모듈을 사용하여 A1 HD25 / A1R HD25가 공 초점 이미지를 얻는 동시에 샘플의 원하는 영역을 자극할 수 있습니다. DMD 모듈은 사용자 정의 모양의 여러 관심영역(ROI)을 동시에 자극합니다.
※ Ti2-LAPP 모듈 식 조명 시스템
Nikon Ti2-LAPP 시스템은 TIRF(total internal reflection fluorescence : 전 반사 형광), 광 활성화 / 전환, photobleaching(광 표백) 및 epi-fluorescence(반사 형광)뿐만 아니라 초 해상력 현미경 (N-STORM)을 위한 모듈 방식 조명 장치를 제공합니다. 각 모듈은 유연하게 결합되어 개별 연구 요구에 최적화된 현미경 시스템을 구축할 수 있습니다. 예를 들어, 다수의 TIRF 모듈은 이방성 실험 및 고속, 다중 각도 TIRF 이미징을 위해 단일 현미경에 통합 장착될 수 있습니다. Ti2의 다 층 구조와 결합하여 최대 5개의 조명 모듈을 단일 현미경 (예 : 2 개의 TIRF, FRAP, DMD 및 Epi-FL 모듈 모두 하나의 Ti2에 통합 할 수 있음)에 통합 장착할 수 있습니다.
※ DMD 모듈 - 임의 형상의 다점 ROI를 동시에 빛 자극
DMD 모듈은 사용자가 지정한 패턴 및 위치의 광 활성화 및 광 변환을 가능하게하는 반면, 기존 FRAP 장치는 수동으로 배치된 단일 지점의 광 활성화 만을 가능하게 하는 반면, DMD 조명 모듈은 모양, 크기, 위치 및 갯수를 NIS-Elements 소프트웨어를 사용하여 자유롭게 사용자 정의할 수 있습니다. 이 기능을 통해 연구원은 단일 세포 또는 여러 세포 내에서 세포 또는 단백질 집단의 일부를 광학적으로 표시하여 행동을 추적할 수 있습니다. DMD 모듈은 고도로 맞춤화된 ROI(관심영역)를 사용하여 세포 또는 단백질 집단의 하위 집합에서 기능적 변화를 광학적으로 유도할 수 있는 광학 유전학 실험에도 최적의 장비입니다. DMD 모듈은 레이저 조명 또는 빛에 의한 독성이 덜한 LED 조명과 함께 사용할 수 있습니다.
mCherry로 태그된 A형 라민(적색)과 빛 활성화 GFP로 태그된 A형 라민과 공동 발현하는 생쥐 배아 섬유 아세포를 우측 하부 영역을 DMD 모듈을 사용하여 405nm 파장의 LED 빛으로 빛 자극(녹색) 및 반사 형광 조명은 시간 경과 사진을 찍어, 라민 단백질의 하위 집단을 광활성하여 그 동태와 서브 유닛 교환을 거동을 관찰할 수 있습니다.
이미지 제공 : 노스 웨스턴 대학교 의과 대학, Takeshi Shimi 박사와 Bob Goldman 박사
※ H-TIRF 모듈 - TIRF 관찰의 자동화를 실현
TIRF 관찰을 위한 이상적인 레이저 입사 각도와 광학 초점 정렬은 시료 및 관찰 조건에 따라 미묘하게 다르기 때문에 지금까지 설정 및 조정하려면 기술과 경험이 필요합니다. H-TIRF 모듈은 반사 빔을 모니터링하는 방식으로 시스템이 전 반사 상태를 감지하여 TIRF 관찰을 할 수 있도록 레이저의 초점, 입사 각도와 광학 정렬을 자동으로 조절합니다. 이 자동 레이저 초점 조정 및 입사각 조정은 NIS-Elements 소프트웨어의 자동 정렬 기능에 의해 수행됩니다. 에바네센트 영역의 입사 각도와 침투 깊이 설정은 목적별로 또는 파장별로 저장하고 호출 할 수 있으므로 항상 일정한 조건에서 관찰이 가능합니다.
또한 그라데이션 ND 필터를 사용하면 시야의 구석구석까지 균일한 밝기의 고 품질 TIRF 이미지를 획득할 수 있습니다.
Tetramethylrhodamine와 Alexa Fluor® 647에서 형광 태그된 미세 소관과 Alexa Fluor® 488에서 형광 태그된 튜블린 결합 단백질의 in vitro 표본을 H-TIRF 모듈 및 그라데이션 ND 필터를 사용하여 3가지 다른 파장으로 촬영되었으며, 입사 각도는 각각의 파장에 대해 자동으로 조정되어 있습니다.
이미지 제공 : 샌프란시스코 캘리포니아 대학, Melissa Hendershott 박사와 Ron Vale 박사센 프란시스코 캘리포니아 대학
그라데이션 ND 필터가 없으면, TIRF 조명은 중앙이 가장 밝은 상태에서 FOV에 가우스 프로파일을 표시합니다.
그라데이션 ND 필터를 사용하면 매우 균일한 TIRF 조명을 얻을 수 있습니다.
그라데이션 ND필터를 사용하지 않는 경우, TIRF 조명은 시야의 중앙부가 가장 밝은 정규 분포를 나타내지 만 그라데이션 ND필터를 사용하여 매우 균일한 TIRF 조명을 얻을 수 있습니다.
Alexa Fluor® 488(녹색)과 Alexa Fluor® 561(적색)으로 태그된 막 단백질을 포함하는 지질 이중 막의 in vitro 표본을 H-TIRF 모듈을 사용하여 두 개의 서로 다른 파장(2 색상 TIRF)에서 이미지화 하였습니다. (상단) 단백질이 응집하여 원형 구조의 시각화 된 클러스터를 형성. (하단) 밝기의 차이를 색으로 표시하는 참조 테이블(레인보우 룩업 테이블)을 사용하여 488nm 채널을 표현, H-TIRF 모듈은 다양한 파장에 대해 최적의 입사 각도가 자동으로 얻을 수 있습니다.
이미지 제공 : 샌프란시스코 캘리포니아 대학, Xiaolei Su 박사와 Ron Vale 박사
※ N-STORM 모듈 2 - 기존의 현미경 10 배의 초 해상력
자동 정렬 기능 외에도 전기 제어에 의한 조명 영역 변경 기능 (1× 2× 4×)를 탑재하고 Ti2-LAPP 시스템에서의 초 해상력 N-STORM 관찰을 실현했습니다. 기존의 광학 현미경의 10 배의 놀라운 이미지 해상도 (약 20nm)를 실현. 현지화 법의 채용에 의해, 단백질 간의 상호 작용을 분자 수준에서 관찰할 수 있습니다.
※ FRAP 모듈 - 세포 내 단백질의 동태 분석
Kaede 나 PA-GFP 등의 광 활성(Photoactivation), 광 변환(Conversion) 형광 단백질을 이용한 광 자극(Photobleaching) 시간 간격(Timelapse) 이미지를 높은 프레임 속도의 고감도 카메라로 얻을 수 있습니다. 세포의 특정 부위에 임의의 스팟 직경으로 레이저를 조사할 수 있기 때문에 포인트 스캔닝 공 초점 현미경 시스템을 사용하지 않고 간편하게 세포 내 단백질 분자의 동태 관찰 및 특정 세포의 마킹이 가능하며 비용면에서 효율적인 수단을 제공합니다.
mCherry로 태그된 A형 라민을 발현 생쥐 태아 섬유 아세포의 오른쪽 상단의 핵을 FRAP 모듈을 사용하여 빛 바래거나 A형 라민 분자의 동태를 촬영. 시간 경과(Timelapse) 이미지는 반사 형광 조명에 의해 획득했습니다.
이미지 제공 : 노스 웨스턴 대학교 의과 대학, Takeshi Shimi 박사와 Bob Goldman 박사
※ TIRF 모듈 - 세포막의 동태와 단 분자의 관찰
수동 레이저 TIRF 모듈도 H-TIRF 모듈과 마찬가지로 그라데이션 ND필터를 탑재하고 시야 전체에 걸쳐 균일한 TIRF 조명을 실현했습니다. 세포 막 근방의 단백질 분자와 그 동태가 고 감도 카메라를 사용하여 높은 S/N(신호 대 잡음)비를 획득할 수 있습니다.
※ 넓은 시야영역(F.O.V.) 용 반사 형광(EPI-FL)모듈 - 대형 카메라 센서에서 형광 이미징
수동 레이저 TIRF 모듈도 H-TIRF 모듈과 마찬가지로 그라데이션 ND필터를 탑재하고 시야 전체에 걸쳐 균일한 TIRF 조명을 실현했습니다. 세포 막 근방의 단백질 분자와 그 동태가 고 감도 카메라를 사용하여 높은 S/N(신호 대 잡음)비를 획득할 수 있습니다.
※ XY 갈바노 스캐닝 유닛 - 동시 광 자극 및 공 초점 이미징
XY 갈바노 스캐닝 유닛은 샘플의 모든 영역을 레이저에 의해 포인트 스캔으로 자극할 수 있는 광 자극 모듈입니다. Ti2-E에 공 초점 현미경 A1 HD25 / A1R HD25과 동시 탑재하여 샘플을 빛 자극하면서 동시에 살아있는 세포 역학을 공 초점 이미징할 수 있습니다.
* A1 HD25 / A1R HD25 이외에서는 사용할 수 없습니다.
※ 모듈 조합의 유연성이 우수
Ti2-LAPP 시스템은 모듈을 자유롭게 선택하여 조합 할 수 있기 때문에 연구에 필요한 기능을 탑재 한 이미징 시스템을 구축할 수 있습니다. 연구자마다 실험 목적에 맞는 모듈의 교환이나 실험의 진행과 변화에 따라 모듈 추가가 가능합니다.
예를 들어, 2개의 TIRF 모듈을 동시 탑재함으로써 파장마다 입사각도를 최적화 한 TIRF 모듈의 전환 만으로 이방성 실험과 2파장 TIRF 이미지 수집이 효율적으로 빠르게 할 수 있습니다. 하나의 TIRF 장치에서 파장을 전환 시스템처럼 파장 변경될 때마다 입사 각도를 조정할 필요가 없습니다.
또한, 광 자극(DMD) 모듈을 추가함으로써 단백질 군의 전체 그림에서 파악하기 어려운 특정 단백질의 거동 추적이 가능합니다.
※ 반사 조명 2단 구성 기능
Ti2의 반사 조명 2단 구조를 이용하여 여러 모듈을 상하 2단으로 동시에 탑재할 수 있습니다. 두 단에 탑재하여 각각의 모듈에 적합한 필터를 사용할 수 있습니다.
예를 들어, 하단에 H-TIRF 모듈 상단에 DMD 모듈을 탑재 한 경우 하단의 형광 큐브 터렛은 TIRF용 필터 큐브 상단 형광 큐브 터렛은 빛 자극에 대한 필터 큐브를 각각 탑재할 수 있기 때문에 최적의 필터링이 쉽게 실험의 정확성과 속도가 크게 향상됩니다.
EOS로 태그된 튜블린을 발현한 초파리 S2 세포. 단일 미세 소관의 끝은 DMD 모듈과 405 nm LED 빛을 사용하여 광 변환되었다. 듀얼 컬러 TIRF의 저속 이미지는 H-TIRF 조명 장치를 사용하여 획득했습니다. 광 변환 된 적색 미세 소관의 성장 끝 부분에 변환되지 않은 녹색 튜 불린을 첨가하고 광 변환 된 부분을 짧게 (그리고 결국 사라짐)하여 미세 소관의 역동적 인 불안정성을 나타냅니다. 화살표는 광 변환 한 미세 소관의 성장과 수축을 나타냅니다.
이미지 제공 : 샌프란시스코 캘리포니아 대학, Nico Stuurman 박사와 Ron Vale 박사
이미지 수집에서 분석까지 통합 소프트웨어 플랫폼
니콘의 이미지 통합 소프트웨어 NIS-Elements C는 직관적인 워크 플로우에서 공 초점 이미징이 가능합니다. JOBS 및 일반 분석 등의 비주얼 프로그래밍 도구를 추가하여 일련의 현미경 조작을 자동화하고 이미지 검색에서 분석까지의 복잡한 실험을 쉽게 사용자에 의해 정의할 수 있습니다.
※ NIS-Elements C-ER
한 번의 클릭으로 간단하게 조작하고 선명한 고 해상도 공 초점 이미지를 검색할 수 있습니다. 소프트웨어가 자동으로 검색 이미지를 분석. 최적의 이미지 처리 매개 변수를 결정하여 고 해상도 이미지를 생성합니다. 독자적인 화상 처리 기술은 기존보다 높은 해상도 이미지 수집을 실현했습니다. (기존 대비 XY 방향으로 약 1.5 배, Z 방향으로 약 1.7 배 향상)
배양 후 21일 마우스 해마 신경 세포, 녹색 : GFP(돌기), 빨강 : PSD-95-TagRFP (시냅스 후부 마커)
이미지 제공 : 도쿄 대학 대학원 의학 연구과 신경 세포 생물학 분야, Yutaro Kashiwagi 박사와 Shigeo Okabe 박사.
※ NIS-Elements HC (High-Content Analysis)
대량 샘플의 다차원 이미지 검색에서 정량 데이터의 추출, 또한 그 해석까지를 자동으로 할 수 있습니다. 미리 준비된 HC 템플릿을 사용하여 실험 준비에 소요되는 시간을 단축하고 부드러운 실험 시작을 지원합니다. 각각의 웰 마다 경향(측정 데이터)을 히트 맵 등의 형식으로 표시할 때도 촬영과 동시 진행으로 이미지 분석을 할 수 있기 때문에 이러한 일련의 작업 시간을 최소화 할 수 있습니다.
영상획득 설정
다양한 형식의 결과 표시
광도분석
※ JOBS
매크로 구축 등의 고급 프로그래밍 지식 없이도 이미지 수집에서 분석까지 더 복잡한 실험 템플릿을 쉽게 사용자 정의할 수 있습니다. 이미지 검색, 이미지 데이터 분석, 분석 결과 표시 등의 관찰 과정을 자동으로 수행할 수 있으므로 데이터 검색 및 분석·수집을 위한 시간을 크게 단축합니다.
이미지 타일링(스티칭) 설정
CFI Plan Apochromat Lambda 10X 대물렌즈로 캡쳐된 marmoset brain의 스티치(타일링) 이미지
※ 일반분석
현미경 이미지에서 통계 데이터를 수집하기 위한 사용자 독자적인 해석 절차를 구축할 수 있는 강력한 도구입니다. 복잡하게 정의된 이미지 분석 처리는 대화식 (또는 완전 자동)으로 보다 쉽게 분석 결과를 얻을 수 있고 사용자 정의 결과를 출력할 수 있습니다.
신경 세포의 측정 설정
측정 결과
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우수한 투과율을 위한 나노 크리스탈 코팅
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