·Î±×ÀÎ £ü ȸ¿ø°¡ÀÔ £ü ¸¶ÀÌÆäÀÌÁö
Åõ°ú   ¹Ý»ç










 








»óÇ°¸í : N-SIM-E
Ä«Å×°í¸® : ÃÊ ÇØ»ó·Â Çö¹Ì°æ / Super Resolution Microscope
±â´É¿É¼Ç
Ä«´Þ·Î±× : 201707051145281210.pdf
N-SIM°ú °°Àº ÃÊ ÇØ»ó·Â À̹Ì¡ÀÌ °¡´ÉÇÑ °³ÀÎ À¯ÇüÀÇ ÃÊ ÇØ»ó·Â Çö¹Ì°æ
N-SIM-E´Â ÃÊ ÇØ»ó·Â Çö¹Ì°æ N-SIM°ú °°Àº ³ôÀº ÇØ»óµµÀÇ ÃÊ ÇØ»ó·Â À̹ÌÁö¸¦ ¾òÀ» ¼ö ÀÖ´Â °³ÀÎ À¯ÇüÀÇ ÃÊ ÇØ»ó·Â Çö¹Ì°æÀÔ´Ï´Ù.
±âº»Àû, ÀϹÝÀûÀ¸·Î »ç¿ëµÇ´Â ¿©±â ÆÄÀå ¹× À̹Ì¡ ¸ðµå¸¦ Áö¿øÇÏ´Â Àú·ÅÇÏ°í °£¼ÒÈ­µÈ ÃÊ ÇØ»ó·Â ½Ã½ºÅÛÀÌ´Ù.
±¸Á¶È­ Á¶¸í Çö¹Ì°æ(Structured Illumination Microscopy)À» ä¿ëÇÏ¿© ºûÀÇ È¸Àý ÇѰ踦 ¶Ù¾î ³Ñ´Â ±âÁ¸ ±¤ÇÐ Çö¹Ì°æÀÇ ¾à 2¹è(115nm)ÀÎ ÃÊ ÇØ»ó·Â À̹Ì¡ÀÌ °¡´ÉÇÕ´Ï´Ù.
±âÁ¸ÀÇ ±¤ÇÐ Çö¹Ì°æÀÇ ¾à 2 ¹èÀÇ ÇØ»ó·Â
N-SIM-E´Â ±¸Á¶È­ Á¶¸í Çö¹Ì°æ(Structured Illumination Microscopy)À» ä¿ë ÇÑ ÃÊ ÇØ»ó·Â Çö¹Ì°æÀÔ´Ï´Ù. ȹ±âÀûÀÎ À̹Ì¡ ¹æ¹ý°ú CFI SR Apochromat TIRF 100xH ´ë¹° ·»Áî N.A.(Numerical Aperture, °³±¸¼ö) = 1.49 µî ´ÏÄÜÀÇ °í±Þ ±¤ÇÐ ±â¼ú°ú °áÇÕÇÏ¿© Çػ󵵸¦ ±âÁ¸ÀÇ ±¤ÇÐ Çö¹Ì°æÀÇ ¾à 2¹è(115nm)±îÁö Çâ»ó½ÃÄÑ »ì¾ÆÀÖ´Â ¼¼Æ÷ÀÇ ¹Ì¼¼ ±¸Á¶ ¹× ¹°ÁúÀÇ ¿òÁ÷ÀÓÀÇ ÃÊ ÇØ»ó·Â¿¡ ÀÇÇÑ °¡½Ã¼ºÀ» È®º¸Çß½À´Ï´Ù.
* 3D-SIM ¸ðµå (488nm ¿©±â)ÀÇ °æ¿ì
YFP·Î Ç¥½Ä ÇÑ B16 Á¾¾ç ¼¼Æ÷ÀÇ ¹Ì¼¼ ¼Ò°ü
´ë¹° ·»Áî : CFI ¾ÆÆ÷ Å©·Î ¸¶Æ® TIRF 100xH (NA1.49)
Ãëµæ ½Ã°£ : ¾à 1.8 ÃÊ / Àå (µ¿¿µ»ó)
ÃÔ¿µ ÇùÁ¶ : Dr. Yasushi Okada, Laboratory for Cell Polarity Regulation, Quantitative Biology Center, RIKEN
GFP·Î Ç¥ÁöÇÑ HeLa »ý ¼¼Æ÷ÀÇ ¼ÒÆ÷ü
´ë¹° ·»Áî : CFI ¾ÆÆ÷ Å©·Î ¸¶Æ® TIRF 100xH (N.A. 1.49)
Ãëµæ ½Ã°£ : ¾à 1.5 ÃÊ/Àå (µ¿¿µ»ó)
ÃÔ¿µ ÇùÁ¶ : Dr. Ikuo Wada, Institute of Biomedical Sciences, Fukushima Medical University School of Medicine
ÃÊ ÇØ»ó·Â À̹ÌÁö¸¦ ¾à ÃÊ ´ç 1ÇÁ·¹ÀÓÀÇ ¼Óµµ·Î ¼Õ½±°Ô Ãëµæ
N-SIM-E´Â ±¸Á¶È­ Á¶¸í ±â¼ú ¹× »ý ¼¼Æ÷ À̹Ì¡À» À§ÇÑ È¿°úÀûÀÎ ½Ã°£ÀÎ ¾à ÃÊ ´ç 1ÇÁ·¹ÀÓÀÇ ºü¸¥ À̹Ì¡ ¼º´É°ú ÃÊ ÇØ»ó·ÂÀ» Á¦°øÇÕ´Ï´Ù.
3D-SIM ¸ðµå¿¡ ÀÇÇÑ Z Ãà ¹æÇâÀÇ ÃÊ ÇØ»ó °üÂû
½½¶óÀ̽º 3D-SIM ¸ðµå´Â »ý ¼¼Æ÷ ½Ã·á¿¡ 300nmÀÇ Çػ󵵿¡¼­ÀÇ ±¤ÇÐ Ãà ¹æÇ⠴ܸé°ú ÃÊ ÇØ»ó·Â À̹Ì¡À» Çã¿ëÇÑ´Ù. ¿É¼ÇÀ¸·Î ½ºÅà 3D-SIM ¸ðµå´Â ½½¶óÀ̽º 3D-SIM ¸ðµåº¸´Ù µÎ²¨¿î ½Ã·á¸¦ ³ôÀº ÄÜÆ®¶ó½ºÆ®·Î À̹Ì¡ °¡´ÉÇÕ´Ï´Ù.
ÃÊ ÇØ»ó À̹ÌÁö (Slice 3D-SIM ¸ðµå) ±âÁ¸ÀÇ ±¤ÇÐ Çö¹Ì°æ »çÁø
¸· »ö¼Ò Nile Red (»¡°­)·Î ¿°»öÇÏ¿© GFP (³ì»ö)°ú À¶ÇÕ µÈ ¼¼Æ÷ ºÐ¿­ ´Ü¹éÁú DivIVAÀ» ¹ßÇö ÇÑ °íÃÊ±Õ ¹ÚÅ׸®¾Æ ÃÊ ÇØ»ó À̹ÌÁö¿¡ ÀÇÇØ ¼¼Æ÷ ºÐ¿­ ÁßÀÇ ´Ü¹éÁúÀÇ Áö¹æÈ­¸¦ Á¤È®ÇÏ°Ô ½Ã°¢È­ ÇÒ ¼ö ÀÖ½À´Ï´Ù.
ÃÔ¿µ ÇùÁ¶ : Drs. Henrik Strahl and Leendert Hamoen, Centre for Bacterial Cell Biology, Newcastle University
Stack 3D-SIM ¸ðµå (Volume view) Stack 3D-SIM ¸ðµå
(Maximum Intensity projection)
¾ÈƼ °¢Áú Áß°£ Çʶó¸àÆ® Ç×ü·Î ºÐ·ùÇÏ°í Alexa 488 Ç¥Áö ÀÌÂ÷ Ç×ü·Î ¿°»ö ÇÑ ¸¶¿ì½ºÀÇ °¢Áú »ý¼º ¼¼Æ÷
ÃÔ¿µ ÇùÁ¶ : Dr. Reinhard Windoffer, RWTH Aachen University
3°³ÀÇ ·¹ÀÌÀú¸¦ ÀÌ¿ëÇÑ ¿©·¯ °¡Áö ºû±òÀÇ ÃÊ ÇØ»ó·Â À̹Ì¡ÀÌ °¡´É
N-SIM-E ¿ëÀ¸·Î °³¹ßµÈ ¼ÒÇü LU-N3-SIM ·¹ÀÌÀú ÀåÄ¡´Â ¹ü¿ë¼ºÀÌ ³ôÀº 3 ÆÄÀåÀÇ ·¹ÀÌÀú (488/561/640nm)¸¦ žÀçÇÏ¿© ¿©·¯ °¡Áö ºû±òÀÇ ÃÊ ÇØ»ó·Â À̹Ì¡ÀÌ °¡´ÉÇÕ´Ï´Ù.
¿©·¯ ±¸Á¶Ã¼ÀÇ À§Ä¡ °ü°è, ´Ù¸¥ ¹°ÁúÀÇ Áö¹æÈ­¿Í »ó°ü µ¿Á¤ µîÀ» °üÂûÇÒ ¼ö ÀÖ½À´Ï´Ù.
±¸Á¶È­ Á¶¸í Çö¹Ì°æ ¹ý (Structured Illumination Microscopy)ÀÇ ¿ø¸®
ÁÙ¹«´Ì Á¶¸í¿¡¼­ ž ¸ð¾Æ·¹ ÁÙ¹«´Ì¸¦ Àаí À̹ÌÁö ó¸® ±¸Á¶¸¦ º¹¿ø
ƯÁ¤ À½¿µ ÆÐÅÏÀ¸·Î Á¶¸íÇÏ´Â "±¸Á¶È­ Á¶¸í"¶ó°í Ç¥º»ÀÇ ¹Ì¼¼ ±¸Á¶¿¡ ÁÙ¹«´Ì ¸ð¾çÀÇ Á¶¸í ÆÐÅÏÀ» ³õÀ¸¸é ¸ð¾Æ·¹¶ó´Â °ÅÄ£ ÁÙ¹«´Ì°¡ ³ªÅ¸³³´Ï´Ù.
¹°°á ¹«´Ì´Â Ç¥º»ÀÇ ¹Ì¼¼ ±¸Á¶ÀÇ Á¤º¸°¡ º¯Á¶µÇ¾î Æ÷ÇԵǾî Àֱ⠶§¹®¿¡ ¸ð¾Æ·¹¸¦ ÃÔ»óÇÏ¿© À̹ÌÁö ÀÛ¾÷À» ÅëÇØ ¿ø·¡ÀÇ ±¸Á¶¸¦ º¹¿øÇÏ¿© Çö¹Ì°æÀÇ ºÐÇØ´ÉÀ» ÃÊ°ú ÇÑ ¹Ì¼¼ ±¸Á¶¸¦ À̹Ì¡ ÇÒ ¼ö ÇÕ´Ï´Ù.
ÀÌ°ÍÀÌ ±¸Á¶È­ Á¶¸í Çö¹Ì°æ ¹ýÀÔ´Ï´Ù.
¾Ë·ÁÁø ³ôÀº °ø°£ ÁÖÆļö ÆÐÅÏ Á¶¸íÀ» Á¶»çÇÏ¿© ¹Ì¼¼ ±¸Á¶ÀÇ ÃÊ ÇØ»ó·Â Á¤º¸°¡ ¸ð¾Æ·¹ ÁÙ¹«´Ì·Î ¾òÀ» ¼ö ÀÖ´Ù.
¿©·¯ À̹ÌÁö¿¡¼­ ÃÊ ÇØ»ó·Â À̹ÌÁö ±¸Ãà
±¸Á¶È­ Á¶¸í¿¡¼­ ¾ò¾îÁø ¸ð¾Æ·¹ À̹ÌÁö´Â »ùÇÃÀÇ ¹Ì¼¼ ±¸Á¶ÀÇ Á¤º¸°¡ Æ÷ÇԵǾî ÀÖ½À´Ï´Ù.
±¸Á¶È­ Á¶¸íµÈ 1°³ÀÇ °Ë»ö À̹ÌÁö Á¤º¸°¡ ºÎÁ·Çϱ⠶§¹®¿¡ À§»ó°ú ¹æÇâÀ» ¹Ù²Ù¾î ¿©·¯ ÀåÀÇ »çÁøÀ» ÃëµæÇÑ ÈÄ ¾ò¾îÁø ¸ð¾Æ·¹ ÁÙ¹«´Ì¿¡¼­ À̹ÌÁö ÀÛ¾÷À» ÅëÇØ ¹Ì¼¼ ±¸Á¶¸¦ ÃßÃâÇÏ¿© ±âÁ¸ÀÇ ¾à 2¹èÀÇ ÃÊ ÇØ»ó·Â À̹ÌÁö¸¦ ±¸ÃàÇÕ´Ï´Ù.

°íÁÖÆÄ ÁÙ¹«´Ì Á¶¸íÀ» ÀÌ¿ëÇÏ¿© ¾à 2¹è ÇØ»ó·ÂÀ» Çâ»ó
Çö¹Ì°æÀÇ ÇØ»ó·ÂÀ» ³ôÀÌ·Á¸é È®»ê °¢µµ Å« ȸÀý ±¤ÇÐ Çö¹Ì°æ¿¡ Æ÷ÇÔ½ÃÄѾßÇÏÁö¸¸ ½ÇÁ¦·Î ĸó °¢µµ´Â ´ë¹° ·»ÁîÀÇ NA·Î Á¦ÇѵDZ⠶§¹®¿¡ ´ë¹° ·»ÁîÀÇ NAº¸´Ù Å« È®»ê °¢À» °¡Áø Ç¥º»ÀÇ ¹Ì¼¼ ±¸Á¶¿¡¼­ÀÇ È¸Àý ±¤À» °¡Á®¿Ã °ÍÀº ºÒ°¡´ÉÇß´Ù.(±×¸² A)±×·±µ¥ Ç¥º» ±¸Á¶È­ Á¶¸íÀ» ÃëÇÏ°Ú´Ù°í ´ë¹° ·»ÁîÀÇ NAº¸´Ù Å« È®»ê °¢À» °®´Â Ç¥º»¿¡¼­ÀÇ È¸Àý ±¤À» ´ë¹° ·»Áî·Î ĸó °¢µµ·Î º¯È¯ ÇÒ ¼ö ÀÖ½À´Ï´Ù (±×¸² B).±× ¶§ ¹ß»ýÇÏ´Â ¸ð¾Æ·¹ ÆÐÅÏÀ» ÀÌ¿ëÇÏ¿© ¸¶Ä¡ NA°¡ 2 ¹è°¡ µÈ °Í °°Àº ÇØ»ó·ÂÀ» ¾òÀ» ¼ö ÀÖ½À´Ï´Ù (±×¸² C).
±×¸² A :
N.A.¿¡¼­ ÇØ»ó·ÂÀÌ Á¦ÇѵȴÙ
±×¸² B :
±¸Á¶È­ Á¶¸íÀº Å« °¢µµÀÇ ±¤¼ÓÀ» ȸÀý½ÃÄÑ NA ¼öÁß¿¡ ³ÖÀ» °¢µµ·Î º¯È¯
±×¸² C :
¸¶Ä¡ 2¹èÀÇ N.A.¸¦ °¡Áö´Â ´ë¹° ·»Áî¿¡¼­ ¾òÀº °Í °°Àº À̹ÌÁö¸¦ ¾òÀ» ¼ö ÀÖ´Ù.
ÃÊ ÇØ»ó·Â Çö¹Ì°æ¿¡ ÃÖÀûÀÎ Àç¹°·»Áî
°íÁ¤ Ç¥º»ÀÇ ÃÔ¿µ¿¡ ÃÖÀû 100x ±â¸§ ħÁö ¸ñÇ¥¿Í ¿ø½Ã ¼¼Æ÷ÀÇ Àú¼Ó ÃÔ¿µ¿¡µµ ´ëÀÀÇÑ´Ù 60x ¹° ħÁö ¸ñÇ¥ÀÇ Çϳª°¡ ¼±ÅÃÇÏ½Ç ¼ö ÀÖ½À´Ï´Ù.
SR (ÃÊ ÇØ»ó) ´ë¹° ·»Áî´Â ±âÁ¸ÀÇ Çö¹Ì°æÀÇ È¸Àý ÇѰ踦 ³ÑÀº ¼º´ÉÀ» Á¦°øÇϱâ À§ÇØ °³¹ßµÇ¾ú½À´Ï´Ù.
ÃֽŠ±¤ÇÐ ¼³°è¿Í ¾ö¼± µÈ ±¤ÇÐ À¯¸®ÇÏ¿© ±¸¸é ¼öÂ÷¿Í ½Ã¸°µµ¸®Ä«·ç ¼öÂ÷¸¦ ±ØÇѱîÁö Àú°¨½ÃŲ ±¤ÇÐ ¼º´ÉÀ» ½ÇÇöÇß½À´Ï´Ù.
CFI SR Plan Apochromat IR 60¹è WI CFI SR Apochromat TIRF 100¹è H
»ç¾ç
¼öÆòÇØ»óµµ CFI SR Apochromat TIRF 100¹è H
ZÃà ÇØ»óµµ 269nm(3D-SIM ¸ðµå)
À̹ÌÁö Ãëµæ ½Ã°£ °¡Àå ºü¸¥ 1 ÇÁ·¹ÀÓ/ÃÊ (Slice 3D-SIM ¸ðµå)
(¶ÇÇÑ 1~2ÃÊ Ã³¸® ½Ã°£ÀÌ ÇÊ¿ä)
È­»ó Ãëµæ ¸ðµå Slice 3D-SIM
Stack 3D-SIM (¿É¼Ç)
¸ÖƼ À̹ÌÁö Áö¿ø 3»ö
»ç¿ë ·¹ÀÌÀú 488nm, 561nm, 640nm
Çö¹Ì°æ ÀüÀÚµ¿ µµ¸³ Çö¹Ì°æ ECLIPSE Ti-E
¿Ïº®ÇÑ ÃÊÁ¡ ½Ã½ºÅÛ (P.F.S.)
ÀÎÄÚ´õ ³»Àå Àüµ¿ XY ½ºÅ×ÀÌÁö
Àüµ¿ Èí¼ö ÇÊÅÍ ÈÙ
ÇÇ¿¡Á¶ Z ½ºÅ×ÀÌÁö (¿É¼Ç)
»ç¿ë ´ë¹°·»Áî 100¹è ¶Ç´Â 60¹è Áß Çϳª¸¦ ¼±ÅÃ
CFI SR Apochromat TIRF 100¹è H (N.A. 1.49)
CFI Apochromat TIRF 100¹è H (N.A. 1.49)
CFI SR Plan Apochromat IR 60¹è WI (N.A. 1.27)
CFI Plan Apochromat IR 60¹è WI (N.A. 1.27)
»ç¿ë Ä«¸Þ¶ó Hamamatsu Photonics K.K.»çÀÇ sCMOS Ä«¸Þ¶ó ORCA-Flash 4.0
¼ÒÇÁÆ®¿þ¾î NIS-Elements Ar ¶Ç´Â C (°ø ÃÊÁ¡ ·¹ÀÌÀú Çö¹Ì°æ C2+¿Í ÇÔ²² ¼³Ä¡ ½Ã)
¸ðµÎ º°¸ÅÀÇ NIS-A N-SIM Analysis ¸ðµâÀÌ ÇÊ¿ä
¼³Ä¡ Á¶°Ç 20¡É~ 28¡É (¿Âµµ º¯È­ 0.5¡É À̳»)
¡Ø 488nmÀÇ ¿©±â¿¡¼­ Á÷°æ 100nmÀÇ ±¸½½À» ÀÌ¿ëÇÏ¿© ÃøÁ¤ÇÑ ÇØ»óµµÀÔ´Ï´Ù.
ÃÖ±Ùº»»óÇ°(1)
N-SIM-E
ÀÌÀü ´ÙÀ½
½ºÅ©·Ñ